实验一 肠缺血一再灌注损伤
实验目的
学习复制肠缺血一再灌注损伤的动物模型，观察小肠缺血一再灌注损伤时血液循环和小肠的形态学变化，探讨缺血一再灌注损伤的机理。
实验原理
结扎肠系膜上动脉造成小肠缺血损伤，解除结扎后小肠发生更为严重的损伤。再灌注损伤是否发生与缺血时间有关。小肠缺血lh，恢复血流后可发生再灌注损伤。再灌注损伤与自由基形成增多、钙超负荷、白细胞的作用及高能磷酸化合物缺乏等有关。
实验动物
正常家兔。
实验器材及药品
兔缺口实验台，二道生理记录仪，压力换能器，张力换能器，玛丽氏鼓，水检压计，微循环观察装置，动脉和静脉导管（可用直径相当的聚乙烯管），5 ml、10 ml注射器，手术器械一套。1％普鲁卡因，0.3％肝素生理盐水，生理盐水。
实验步骤与观察指标
1．取健康成年兔一只，称重后仰卧位固定于缺口兔实验台上，剪去颈部和腹部的被毛。
2．在 1％普鲁卡因局麻下，颈部正中切开皮肤6 cm，分开皮下组织、肌肉，分离气管、左颈总动脉和右侧颈外静脉。插入气管插管，同玛丽氏鼓相连，接张力换能器，并与二道记录仪相连，记录呼吸曲线。左颈总动脉插入动脉导管（管内充满0.3％肝素生理盐水），接压力换能器，与二道记录仅相连，记录血压。
3．给水检压计注入0.3％生理盐水，排出管道中的气泡，使液面在10 CCH2O，并上下调节位置，使水检压计的“0”位与心脏在同一平面。将静脉导管插入右颈外静脉，导管插人6 cm左右，见液面随呼吸波动，液面高度即为中心静脉压值，结扎固定静脉插管。
4．在局麻下作上腹部正中切口，切开皮肤6 cm，沿腹白线打开腹腔，用温生理盐水纱布将内脏轻轻推向左前方，暴露出脊柱及腹膜后组织，找到肠系膜上动脉和肠系膜上静脉，分离周围组织，穿线备用。
5．向微循环灌流盒内注入38℃生理盐水。将一段游离度较大的回肠肠袢轻轻拉出，放入微循环灌流盒内，显微镜下观察肠系膜微循环。
6．静脉注射 0.3％肝素生理盐水2 ml／kg。
7．观察并记录正常血压、呼吸、中心静脉压和肠系膜微循环（注意观察微血管的流速、口径及每个低倍镜视野下开放的毛细血管数目）。
8．轻轻提起肠系膜上动脉的穿线，用动脉夹将肠系膜上动脉夹闭，观察记录上述各项指标的变化。
9．夹闭 lh后，松开动脉夹，恢复肠系膜上动脉的血流，观察 5 min、10 min、30 min和 lh各项指标的变化，然后检查腹腔有无渗出液，肠袢有无淤血、水肿、点状出血等。
注意事项
1．分离肠系膜上动脉和上静脉动作要轻，切勿损伤血管。夹闭血管时，要用带有橡皮套的动脉夹夹闭。
2．牵拉肠袢要轻，以免引起出血和创伤性休克。
3．手术过程中尽量减少出血。分离组织时，要钝性分离，并注意结扎小血管，以免注射肝素后手术部位渗血。
4．应用二道生理记录仪记录血压时，要对传感器、放大器灵敏度进行校正。
思考题
1．小肠缺血一再灌注损伤时，为何发生全身血液动力学的改变？
2．探讨小肠缺血—再灌注损伤的发病机理，你认为要测定哪些指标？
详细请见附件：基础篇－家畜解剖学综合实验.doc
